如何区分DNA连接酶和DNA 聚合酶?:dna连接酶作用部位

DNA连接酶和DNA聚合酶是两种 不同的酶,它们具有各自不同的特征。

1. DNA连接酶

DNA连接酶能够将DNA片段的末 端连接起来,最后将存在的DNA片段连 接成重组DNA。DNA连接酶作用的是 两个DNA片段之间的磷酸二酯键,将 DNA双链的两个缺口同时连接起来,而 不是在单个核苷酸与DNA片段之间形 成磷酸二酯键,它不需要模板的参与。

2. DNA聚合酶

DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸 连接成DNA长链,最后形成新的DNA 分子。DNA聚合酶只能够将单个的脱 氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的 3'末端的羟基上,形成磷酸二酯键,此过 程需要模板链的参与。

DNA连接酶有哪几类?:dna连接酶作用部位

根据酶的来源不同,可以将其分为两类。

1. E. coG DNA 连接酶

它从大肠杆菌中分离得到,只能将双链DNA互补的黏性末端之间连接起 来,而不能对双链DNA片段的平末端之 间进行连接。 、:

1. T4 DNA 连酶 T4 DNA连接酶从T4噬菌体中分 离得到,它既可“缝合”双链DNA互补的 黏性末端,又可“缝合”双链DNA的平末 端,但是连接平末端之间的效率比较低。

DNA连接酶:dna连接酶作用部位

DNA连接酶不可以连接两条单链的DNA。

DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口的酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。

噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链,分子量为60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外,NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率,而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶,还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

DNA连接酶只能连接双链DNA,在单链中DNA连接酶缺乏附着位点。

DNA连接酶 催化双链DNA 或RNA中并列的5′-磷酸和3′-羟基之间形成磷酸二酯键的酶。

单链的合成双链需要形成氢键。

DNA连接酶内容与储存方法是什么?:dna连接酶作用部位

内容与储存方法名称:T4DNALigase数量:20ml保存条件:20℃名称:10xLigationBuffer数量:100ml保存条件:20℃DNA连接T4DNA接酶活性为3u/ml,单位定为Weiss单位(0.01Weiss单位活性的T4DNA接酶在16℃时20ml体系反应20分钟,可以连接95%的1gλDNAHindIII的酶切物)

X染色体连接酶活力测定法有哪些作用呢?:dna连接酶作用部位

哺乳动物性染色体的类型,雌性为XX而雄性为XY型,为了 维持性别之间的基因平衡,在胚胎发育的早期,雌性个体每个细胞中的一条X染色体是失活的,尽管这条X染色体失活的确切时间 尚不知道,但可以肯定的是在这条染色体失活前有一段时间.两条 X染色体均有活性,并进行转录,这表现在胚胎发育的早期,雌性 胚胎X染色体连锁酶的活性是雄性胚胎的两倍。由于不能确切地 知道X染色体失活的时间,因此,这种方法鉴定胚胎的准确率 较低。

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